Экспериментальная разработка, предклинические и клинические испытания новых металлокомплексных препаратов для каталитической терапии рака

(рекламно-техническое описание научно-исследовательской  работы )

   Цель работы: Разработка препаратов и протоколов каталитической терапии онкологических заболеваний и ее сочетания с другими методами, отработка режимов лечения. Совершенствование технологии получения препаратов Терафтал (Тф), Оксикобаламин (Ок), ЭТФ-К и Эфитер. Обеспечение клинических и предклинических исследований этими препаратами. Выяснение механизма каталитической терапии, поиск на этой основе новых методов и систем для повышения эффективности лечения.

   Краткое описание: По технологии, учитывающей требования ФСП к стерильности и апирогенности, наработано 500 г субстанции собственно Терафтала и 300 г Терафтала – кислоты соответствующих по качеству требованиям нормативно – технической документации. Наработано 360 флаконов лекарственной формы Тф-лио по 0,05 г. По модернизированной технологии получено 360 г. комплекса метилполиоксиэтиленового эфира Тф (ЭТФ) с оксипропилированным b-циклодекстрином - (ЭТФ-К), соответствующим по физико-химическим показателям качеству требованиям нормативно–технической документации, но не соответствующим по пирогенности. Изготовлено 120 флаконов по 0,040 мг активного вещества препарата «ЭФИТЕР».

   В соответствии с протоколом 1/2000 лечение каталитической системой на основе Тф получили 22 больных (46 курсов) с разными формами и локализациями злокачественных новообразований в стадии генерализации процесса. Существенных осложнений или побочных явлений не выявлено. У 3 больных – эффект не оценен, у 1 больной  – уменьшение размеров опухолевых очагов и стабилизация процесса, у 9 больных – прогрессирование процесса после более или менее длительной стабилизации, у 9 больных – прогрессирование процесса без стабилизации.

   В соответствии с протоколом 2-2002 (II фаза клинических испытаний каталитической системы на основе Оксикобаламина) лечение получили 27 больных с разными формами злокачественных новообразований. Все пациенты подвергались ранее стандартному противоопухолевому лечению и находились в фазе исчерпанных возможностей других методов терапии. На настоящем этапе больные получили 59 курсов лечения. В 1 случае наблюдался  минимальный лечебный эффект, в 2 случаях – эффект не оценен, в 5 случаях отмечено прогрессирование процесса  после более или менее длительной стабилизации, в 19 случаях – прогрессирование процесса.

   Проведен комплекс биохимических исследований, раскрывающий новые аспекты механизма действия Тф и каталитической системы. Впервые на культуре клеток рака яичника человека с использованием зонда Н₂DCFDA подтверждено образование в клетках свободных радикалов кислорода при действии Тф и Тф+АК. Разработана лекарственная форма препарата II поколения для бинарной каталитической терапии на основе метилполиэтиленгликолевого эфира окта-4,5-дикарбоновой кислоты фталоцианина кобальта (ЭТФ) – препарат ЭФИТЕР.

   Изготовлен макет установки для контроля концентрации Тф в тканях in vivo при эндоскопическом обследовании. Разработан компактный волоконно-оптический спектрометр с  USB- интерфейсом.

   Спектрофотометрическим методом изучены строение и свойства ассоциатов разноименно заряженных молекул РсМ. Рассчитаны константы нестойкости ассоциатов различного состава, изучены окислительно-восстановительные их свойства в водных и неводных средах, охарактеризована их каталитическая активность. Исследована каталитическая активность Pym₈PcCo в присутствии полимера DIVEMA. Показано, что Pym₈PcCo образует с DIVEMой комплекс, неактивный в каталитическом окислении аскорбиновой кислоты

   Детальное описание

   Химико-технологические исследования и разработки

   На Опытном заводе ФГУП "ГНЦ "НИОПИК" продолжены работы по освоению технологии получения субстанции Терафтал (Тф) и Терафтал-кислоты (Тф-кислоты). Разработана и освоена методика очистки препарата Тф, предусматривающая проведение как химической, так и микробиологической очистки получаемых партий, проведена модернизация технологической схемы. Создана особая чистая зона для проведения заключительных стадий микробиологической очистки, предусматривающей обработку растворов Тф апирогенным активированным  углем, стерилизующую фильтрацию через мембрану 0,2 мкм и последующую сушку на распылительной сушилке. При этом обеспечивается непрерывная подача фильтратов на сушку, что исключает контакты очищаемого препарата с окружающей средой. Проведенная серия опытов (13 операций) показала, что разработанная технология позволяет получать апирогенную субстанцию, полностью удовлетворяющую требованиям ФСП № 42-0047168001 (выход апирогенной субстанции составлял » 60-65%). Всего за 2003 г. наработано 500 г апирогенной субстанции Тф. В лаборатории разработки лекарственных форм наработано  360 флаконов лекарственной формы Тф-лио по 0,05 г. В лаборатории химико-фармацевтического анализа проведен  контроль качества субстанции Тф, наработанных для обеспечения клинических и экспериментальных исследований. Все серии субстанции и лекарственной формы отвечают требованиям ФСП.

   Усовершенствована технология химической очистки технического Тф введением в процесс микроультрафильтрационного метода, позволяющего существенно упростить схему производства. Доработана, изготовлена и смонтирована опытно-промышленная установка для отмывки от примесей раствора октакарбокси РсСо после его хроматографической очистки. В установке вместо плоскокамерного мембранного фильтра с поверхностью 0,86 м²  установлен рулонный ультрафильтрационный элемент   ЭРУ-96-475 с  поверхностью 2 м². Проведенные опытные операции подтвердили правильность предложенных решений по автоматизации контроля и управления стадии очистки от солей. Установка позволяет  провести требуемую на этих стадиях очистку за 35-40 часов времени и затратить 280 литров деионизованной воды (вместо ~ 178 часов и 900 литров  соответственно по ВТР № 723), исключает ручной перенос продуктов с одной стадии на другую и, соответственно, потерю продукта на 8%, повышает качество отмывки, сокращает занимаемые аппаратурой производственные площади и облегчает производство.

   Отработана технология получения «Тф-кислоты» - исходного продукта для получения метилполиэтиленового эфира Тф (ЭТФ). Тф-кислота была получена из хроматографически очищенных партий октакарбоксифталоцианина кобальта. Наработано »10 кг пасты ОКК РсСо, из которых получено 300 г. Тф-кислоты с показателями, отвечающими требованиям СТП № 9318-19-057848-466-00.

    Продолжена работа по масштабированию процесса получения препарата ЭТФ-К. Опробован метод выделения препарата ЭТФ-К из водного раствора на распылительной сушилке. Показано, что выделение препарата ЭТФ-К из водного раствора методом распылительной сушки приводит к удалению кристаллизационной воды, в результате чего резко уменьшается растворимость препарата в воде и увеличивается его токсичность.

   Продолжены исследования по изысканию водорастворимых конъюгатов окта-4,5-карбоксизамещенных фталоцианина с аминокислотами. Синтезированы  водорастворимые производные окта-4,5-карбокси-фталоцианинов, содержащие остатки аминокислот, изучены их спектральные и химические свойства. Синтезированы и исследованы водорастворимые производные окта-4,5-карбоксизамещенные фталоцианины с аминокислотами с разным  взаимным расположением карбоксильных и аминогрупп (a,b,g и т. д.), а также с дипептидами и аминосахарами. Разработан и осуществлен доступный метод синтеза нового ряда конъюгатов с аминокислотами разных классов. Получен ряд неизвестных ранее тетракарбоксиалкил- и дикарбоксиалкалимидов металлокомплексов (кобальт, цинк, оксиалюминий) окта-4,5-карбоксифталоцианина.

   Клинические исследования

   В 2003 г. II фазу клинических испытаний проходили две системы для каталитической терапии: на основе Тф - внутривенное введение (Протокол № 1/2000) и на основе Оксикобаламина (Ок) (Протокол № 2-2002).

   Клинические исследования каталитической системы на основе Терафтала проходят в РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, МНИОИ им. П.А. Герцена, НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова (С. - Петербург).

   В РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН продолжалась 2 фаза клинических испытаний каталитической системы Тф+АК по Протоколу 1/2000. В исследование  включено 6 новых пациентов и еще двум больным продолжено лечение, начатое в 2002 г. Т. о. терапию каталитической системой Тф+АК получили 8 больных. Проведено 17 курсов: по одному курсу получили 3 пациента, по два курса – 3, по четыре курса – 2 больных. Все пациенты имели распространенный опухолевый процесс, подтвержденный морфологически,  и ранее подвергались различным вариантам стандартного противоопухолевого лечения, возможности которого были исчерпаны.

   Применение каталитической системы Тф+АК при повторных курсах сопровождалось окрашиванием кожных покровов больных в синюшный цвет. Кратковременное падение артериального давления  зафиксировано у 2 больных. У одного больного во время инфузии Тф отмечено снижение только диастолического давления. Дополнительная медикаментозная коррекция не проводилась.

   Лечебный эффект оценен у всех 8 больных. Прогрессирование болезни после 1-го курса зафиксировано у 3 пациентов, прогрессирование после 2-го курса – у 1, таким образом, лечение было не эффективно у 4 больных из 8 (50%). У 4-х пациентов отмечалась стабилизация процесса в течение 6 недель, эти больные получили по 4 курса лечения. Таким образом, контроль роста опухоли составил 50% (4/8) и наблюдался при следующих заболеваниях: рак почки – 2, саркома мягких тканей – 1, немелкоклеточный рак легкого – 1. Продолжалась II фаза клинического изучения эффективности каталитической системы Тф+АК при внутриартериальном введении по протоколу 2/2000. В исследование включен один  больной с диагнозом рецидив саркомы Юинга правой малоберцовой кости. Каталитическая система вводилась по стандартной методике в бедренную артерию. Лечение не сопровождалось какими-либо побочными реакциями. Через три недели при контрольном осмотре отмечено прогрессирование процесса – угроза распада опухоли. В связи с этим произведена ампутация правого бедра. Признаков лечебного патоморфоза в опухоли при гистологическом исследовании не выявлено.

   Проведена подготовка новых протоколов для клинических испытаний каталитической системы. Подготовлен протокол по изучению эффективности селективно-окклюзионного метода применения каталитической системы Тф+АК для лечения первичных и метастатических опухолей печени. Получено разрешение Комитета по этике при федеральном органе контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств на включение кафедры хирургии печени ММА им И.М. Сеченова в число клинических баз по изучению эффективности внутривенного селективно-окклюзионного способа применения каталитической терапии Тф+АК больным с опухолями печени (Протокол 41 от 21.10.03 г.).

   Подготовлен и передан для утверждения в Институт клинической онкологии ГУ РОНЦ РАМН протокол по внутриплевральному введению каталитической системы «ТФ+АК» для лечения опухолевых плевритов.

   В соответствии с ранее утвержденным Протоколом по оценке эффективности каталитической системы при внутривенном введении на фоне локальной СВЧ гипертермии подготовлено два пациента с диагнозом метастазы рака гортани в лимфоузлы шеи. Завершено их обследование, после которого планируется провести лечение.

   Гипертермия будет проводиться на установке «Яхта-4» для локальной электромагнитной гипертермии при t° - 40° в течение 20 минут после инфузии каталитической системы.

   В химиотерапевтическом отделении НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова МЗ РФ  в результате скрининга (более 30 больных) в группу клинических испытаний включены 10 больных распространенными формами (метастатическими) злокачественных новообразований различных локализаций. Методика и лечение – в соответствии с Протоколом № 1/2000. 10 больным было проведено 17 курсов лечения, причем только по одному - в случаях достоверного прогрессирования опухоли. Одной больной в связи со стабилизацией процесса после 2-х курсов лечения планируется в начале ноября 2003 г. проведение заключительного курса.

   Результаты лечения оценены по лечебному эффекту и переносимости у всех 10 больных. При оценке объективного лечебного ответа у 8 больных из 10 было отмечено прогрессирование опухолевого процесса, в 1 случае - частичная ремиссия, у 1 больной (метастатический рак молочной железы) отмечена стабилизация опухолевого роста. Прогрессирование опухолевого процесса имело место у 6 из 7 больных распространенным (метастатическим) раком молочной железы. В одном наблюдении (рак молочной железы с метастазами в кожу) отмечено кратковременное уменьшение размеров опухолевых очагов на 30% после 1 курса, сохранявшееся на 2-х повторных курсах, но с прогрессированием после окончания лечения. У 1 больной с аденокарциномой кортикального слоя надпочечника отмечена частичная, хотя и кратковременная ремиссия. В 1 случае распространенного рака яичников получено прогрессирование процесса. Следует подчеркнуть, что повторно при проведении II фазы клинических испытаний бинарной каталитической системы на основе Тф была получена частичная ремиссия у больной с распространенной аденокарциномой кортикального слоя надпочечника. Больная с аденокарциномой надпочечника прошла 2 цикла лечения Тф+АК. Клинически значимых объективных или субъективных побочных эффектов применение Тф + АК на фоне премедикации дексаметазоном у всех 10 больных не вызвало. Т.о., лечебный эффект Тф в сочетании с АК при метастатическом раке молочной железы, как и в предыдущих исследованиях по II фазе, не наблюдается.    Рекомендуется целенаправленное  продолжение II фазы в группе больных злокачественными опухолями надпочечника, а также при опухолях других локализаций, кроме рака молочной железы.

   В МНИОИ им. П.А. Герцена МЗ РФ в 2003 г в исследование было включено 4 больных  (12 курсов). Все больные подписывают информированное согласие для участия в клинических испытаниях. Результаты лечения в целом могут быть оценены в настоящее время у 2 больных.

   В 1 наблюдении после 1 курса отмечено субъективное улучшение - уменьшение одышки, увеличение активности. После 2 курсов отмечена стабилизация опухолевого процесса, сохранившаяся в течение 2,5 мес. Всего было проведено 5 курсов. Во 2 наблюдении отмечена стабилизация процесса в печени и отсутствии нарастания  плеврита (всего было проведено 4 курса).

   У всех пациентов на введение каталитической системы не было отмечено токсических реакций.

   Клинические исследования каталитической системы на основе Оксикобаламина

   Клиническое изучение бинарной каталитической системы на основе препарата Оксикобаламин-лио (Ок-лио) по II фазе по протоколу 2-2002 проводится в трех клиниках – МНИОИ им. П.А.Герцена, РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН и НИИ онкологии им. проф. Н.Н.Петрова.

   В РОНЦ РАМН работа проводилась по двум направлениям: подбор больных для включения в исследование и динамическое наблюдение за пациентами, получавшими Оксикобаламин в рамках клинических испытаний. За отчётный год проведено лечение у 12 больных, которые получили 21 курс. Распределение больных по нозологии:  рак яичников-3 (6 курсов);  рак легкого-1 (1 курс); забрюшинная липосаркома -1(6 курсов); саркома мягких тканей-1 (2 курса); примитивная нейроэктодермальная опухоль почки ПНЭТ-2 (2 курса); герминогенная опухоль яичка – 2 (2 курса); рак ротоглотки метастазы в легкие-1 (1 курс); несеминомная герминогенная опухоль правого яичка –1 (1 курс).

   Объективного противоопухолевого эффекта не зарегистрировано. Стабилизация процесса от 6 до 18 недель отмечена у 3-х больных. Максимальный срок стабилизации 18 недель наблюдался у пациентки с диссеминированным раком яичников. Следует отметить, что у 2-х больных при получении стабилизации после первого курса (1) и 2-го курса (1) при дальнейшем лечении отмечено прогрессирование заболевания.
При проведении лечения побочных эффектов не наблюдалось.

   В отделении биотерапии и миелотрансплантации НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова в исследование включено 10 больных с различными формами распространенных  злокачественных опухолей. Суммарно проведено 22 цикла лечения (от 1 до 6 циклов у каждого больного). При применении каталитической системы Ок-лио+АК значимых (3-4 степени) побочных эффектов не наблюдалось. Лечебный эффект оценен у 7 (87,5%) пациентов. Не оценен 1 больной (12,5%). Объективного ответа (частичного и полного регресса опухоли) не отмечено ни у одного больного. Прогрессирование заболевания отмечено у 5 (71,4%) больных.
Стабилизация процесса отмечена у 2 (28,6%) больных после 2 цикла, причём у 1 больного после 4 цикла зарегистрирован минимальный регресс опухоли (суммарное уменьшение размеров опухолевых очагов на 34%). Продолжительность эффекта у данного больного составила 5 мес. Данный больной проходит лечение в НИИ онкологии  по поводу рака прямой кишки с метастазами во внутригрудных лимфатических узлах, мягких тканях передней брюшной стенки и ягодичной области справа и рецидива в малом тазу. Полученный лечебный эффект с положительной субъективной оценкой зарегистрирован у него впервые после выявления отдалённых метастазов. У другой больной, страдающей хондросаркомой с метастазами в лёгких и мягких тканях спины, сохранялась  в течение 3 мес. стабилизация процесса без регресса опухолевых очагов .

   Т.о., препарат Ок-лио обладает определённой противоопухолевой активностью и позволяет получить эффект в виде стабилизации процесса у 2 из 8 больных продолжительностью 4,5 мес. Лечение  Ок-лио  характеризуется удовлетворительной переносимостью и не сопровождается выраженными токсическими реакциями.

   В МНИОИ им. П.А. Герцена МЗ РФ - В МНИОИ им. П.А. Герцена МЗ РФ – продолжены клинические исследования каталитической системы Ок– лио + АК.
  В 2003г в исследование было включено 7 больных (16 курсов лечения). Дополнительного лечения во время проведения курсов  терапии  каталитической системой больные не получали. В целом на фоне применения Ок следует отметить субъективный эффект в виде улучшения самочувствия больных, уменьшения слабости, улучшения аппетита, повышения активности, у одной больной после 2 курсов –стабилизация, после 3-его- прогрессирование,  в 5 случаях наблюдается прогрессирование процесса, один больной не оценен. Никаких токсических реакций зарегистрировано не было.

   Медико-биологические предклинические экспериментальные исследования бинарных каталитических систем

   Разработка новых лекарственных форм Тф

   С целью увеличения поступления Тф в опухолевые клетки разработаны  новые модели лекарственной формы Тф - Тф в наночастицах из полибутилцианоакрилата и Тф в липосомах. Определены основные химико-фармацевтические характеристики новых лек. форм. Выявлено in vitro на клетках рака яичников человека CaOv, что цитотоксическая активность лекарственной формы ТФ - наночастицы возросла почти в 10 раз по сравнению с Тф-лио. Однако в комбинации с АК (1:10) цитотоксическая активность обеих каталитических пар была одинаковой. Т.о., Тф в новой лек. форме сохраняет каталитическую активность.

   Эффективность каталитической системы Тф в нана-частицах (Нч-Тф) оценена на подкожно привитом лейкозе мышей Р-388.  Показано, что система Нч-Тф+АК эффективна в более низких дозах, чем Тф+АК. Установлено (in vitro  и in vivo) усиление цитотоксичности Нч-Тф по сравнению с Тф-лио. Рекомендовано продолжить исследования с лек формы Нч-Тф.
Разработана новая модель лекарственной формы – комплекс РуmРсСо и сополимера дивинилового эфира с малеиновым ангидридом (DIVEMA). Коньюгат  DIVEMA - Руm₈РсСо (1:4) был выделен лиофилизацией из водного раствора, изучены его свойства. Исследование цитотоксичности каталитической системы на основе конъюгата DIVEMA-Pym₈PcCo и АК при одновременном введении показало высокий эффект при концентрации коньюгата 50 мкМ (соотношение молярных концентраций с АК 1:20) и отсутствие цитотоксичности при концентрации 10 мкМ (соотношении компонентов 1:10 или 1:20). При этом сам сополимер дивинилового эфира в диапазоне концентраций 5 – 25 мкМ был слабо цитотоксичен и высоко цитотоксичен в концентрации 50 мкМ. Однако при концентрации 50 мкМ DIVEMA снижал рН питательной среды RPMI 1640 с 7,4 до 5,0, что и вызвало гибель клеток.

   Экспериментальное изучение каталитической системы при внутриплевральном введении грызунам проведено для подготовки Протокола клинического изучения ее эффективности в качестве плевросклерозирующего средства при лечении опухолевых плевритов (ОП). Многократное введение Тф+АК в пределах терапевтических доз и концентраций не вызывает раздражения плевры и не приводит к образованию спаек. Для индукции плевродеза рекомендовано применение Тф в концентрации 1/2-2МПД не менее 0,5% в высоких дозах при стандартном соотношении с АК. Т.о., каталитическую систему Тф+АК можно рекомендовать как для специфического противоопухолевого лечения опухолевых плевритов, так и для плевросклерозирующей терапии онкологических больных.

   Новые аспекты механизма действия ТФ и каталитической системы

   Впервые на культуре клеток рака яичника человека с использованием зонда Н₂DCFDA подтверждено образование в клетках свободных радикалов кислорода при действии Тф и Тф+АК. Уровень радикалов зависит от концентрации компонентов (Тф и АК) и порядка их внесения в инкубационную смесь. Компоненты каталитической системы Тф и АК в зависимости от их концентрации в инкубационной среде могут выступать как продуценты свободных радикалов, так и как антиоксиданты.

   Показано, что Тф является неспецифическим положительным агонистом как b-, так и a-адренорецепторов, взаимодействие с которыми сопровождается увеличением внутриклеточного уровня циклических нуклеотидов. В клетках с высоким базальным уровнем циклических нуклеотидов Тф может конкурировать с гипотензивным препаратом клофелином за адренорецепторы. Показано также, что помимо адренорецепторов Тф может связываться с другими акцепторными белками мембраны.

   Дополнительно к плановым заданиям за отчетный период разработана методика для оценки содержания аскорбиновой кислоты в крови больных, леченных Тф+АК, что позволяет оценить кинетику каталитической активности Тф в организме.

   Исследование эффективности Тф при воздействии ультразвука

   Проведена сравнительная оценка терапевтической эффективности сочетанного действия ультразвука (УЗ) и известных противоопухолевых препаратов (метотрексат, фторурацил, карбоплатин, доксолем). Показано, что эффективность всех указанных цитостатиков повышается в 3 раза по сравнению с контролем. Продолжено изучение сочетанного действия УЗ и цитостатиков с целью дальнейшего их использования в комбинированной схеме терапии совместно с Тф. Установлено, что для случая карбоплатина снижение интенсивности УЗ в 2 раза (1,5 Вт/см²) при соответствующем увеличении продолжительности облучения не отражается на результирующем терапевтическом эффекте. Показана терапевтическая эффективность сочетанного использования Тф, УЗ и сарколизина. При изучении токсикологического действия установки УСДТ установлено, что при рабочих параметрах (фиксированной частоте, мощности и времени воздействия) и при повышенных параметрах мощности однократного воздействия не наблюдаются функциональные патологические изменения в органах и тканях крыс.

   В рамках представлений о гетерогенном механизме методом мессбауэровской спектроскопии проведено сравнительное изучение влияния полимерной матрицы на структуру модельного модификатора. Показано, что полимерная матрица существенным образом влияет на структурные и кинетические параметры дисперсной фазы. Развиты представления о гетерогенном механизме сонодинамических эффектов. Разработана физико-химическая и математическая модель фазообразования в гелевых средах (имитатах опухоли), основанная на подходах, развитых в математическом моделировании химической кристаллизации в пористых средах. Проведен вычислительный эксперимент. Предложенная модель распространена на случай, приближенный к реальной ситуации фазообразования и растворения соносенсибилизаторов в опухолевой ткани и двукратного введения препарата.

   Скрининг новых катализаторов

   Проведена оценка цитотоксической активности нового фталоцианинового комплекса Фталоплата, синтезированного в ФГУП "ГНЦ "НИОПИК" в качестве катализатора для каталитической терапии. Фталоплат в диапазоне исследованных концентраций 10-50мкМ не проявил цитотксического действия. Каталитическая система Фталоплат + АК при концентрации компонентов 50 мкМ и 1000 мкМ соответственно (соотношение 1:20) проявила слабый цитотоксический эффект на клетках линии СаОv (38,7% торможения пролиферации опухолевых клеток), что близко к цитотксическому действия АК в концентрации 1000 мкМ. На основании полученных результатов сделано заключение о не перспективности использования Фталоплата в каталитической системе в качестве катализатора. Рекомендовано дальнейшее изучение Фталоплата в качестве потенциального соносенсибилизатора.

   На мышах с п/к Р-388 проведено изучение противоопухолевой активности in vivo каталитических систем на основе комплексов типа «сэндвич» [1PYMPcCo:1TФ] и холинового производного терафтала CholoPcCo отдельно и в сочетании с аскорбиновой кислотой. В результате скрининга «сэндвич» в изученных дозах  (PYM+TF - 32 мг/кг + 20 мг/кг) был признан неэффективным. CholoPcCo в соотношении с аскорбиновой кислотой 1:70 (20 + 132 мг/кг) отобран на углубленное изучение.

   Экспериментальное изучение бинарных каталитических систем на основе Оксикобаламина и полиоксиэтиленового эфира Терафтала

   Разработка модифицированных протоколов клинических испытаний каталитических систем на основе Оксикобаламина

   В 2003 было разработано три дополнительных протокола клинических испытаний БКС Ок-лио + АК по II фазе (модификация протокола 2-2002):
Протокол 2-2002-А  – эскалация дозы БКС; Протокол 2-2002-Б -оптимизация соотношения Ок и АК; Протокол 2-2002-В - внутриполостное применение БКС. Указанные выше протоколы утверждены председателем комиссии по противоопухолевым препаратам при ФК МЗ РФ проф. А.М.Гариным и одобрены Национальным этическим комитетом МЗ РФ. 

   Фармакологический комитет Министерства здравоохранения Российской Федерации 26 июня 2003 г принял решение продолжить клинические исследования БКС Ок-лио + АК по II фазе по протоколам № 2-2002-А, № 2-2002-Б, № 2-2002-В (протокол № 6 от 26 июня 2003 г). После получения разрешения МЗ РФ будет начато клиническое изучение БКС Ок-лио + АК по представленным модифицированным протоколам в рамках II фазы.

   В отчетный период разработан Протокол 2-2002-Г «Клиническое изучение комбинированного применения БКС Ок-лио + АК и препарата «Цисплатин» у больных злокачественными новообразованиями (II фаза)». Протокол направлен на рассмотрение в комиссию по противоопухолевым препаратам при ФК МЗ РФ. Оформлен пакета нормативно-технической документации в ФК МЗ РФ для получения разрешения на клиническое изучение комбинированного применения БКС Ок-лио + АК и препарата «Цисплатин».

   Медико-биологическое изучение комбинированного применения БКС Ок-лио + АК и лучевой терапии

   В исследованиях на мышах с асцитной опухолью, (асцитная опухоль Эрлиха) было установлено, что сочетанное применение БКС Ок-лио + АК (внутрибрюшинное введение препаратов) и лучевой терапии (тотальное облучение) в режиме: «Облучение (0,5 Гр), 1 сутки + БКС Ок-лио + АК (75 мг/кг) приводило к излечению 80% – 100% животных.

   В отчетный период начаты исследования по изучению с солидными опухолями при системном введении компонентов БКС и локальном облучении опухоли. Отработана методика локального облучения солидной опухоли мышей – эпидермоидной карциномы легких Льюис; БКС Ок-лио + АК, вводимая через 24 часа после сеанса лучевой терапии в дозе 25 Гр и 15 Гр повышает эффективность лечения животных с LLC на 30% (оценка эффекта по ТРО) по сравнению с эффективностью лучевой терапии, использованной в моноварианте в аналогичном режиме. Таким образом, в экспериментах на мышах с солидной опухолью (LLC) показано, что БКС Ок + АК при системном введении повышает противоопухолевую эффективность лучевой терапии, т.е. обладает радиомодифицирующими свойствами. Полученные данные свидетельствуют о целесообразности дальнейшего углубленного изучения радиомодифицирующих свойств БКС на основе препаратов Ок-лио, Тф-лио и ЭФИТЕР, т.к. создание эффективных радиомодификаторов является одной из актуальнейших задач современной клинической онкологии.

   Разработка лекарственного препарата «ЭФИТЕР»

   Препарат «ЭФИТЕР» представляет собой мелкокристаллический порошок темно-синего цвета, без запаха. Растворим в воде.

   Лекарственная форма: комплекс включения метилполиэтиленгликолевого эфира окта-4,5-дикарбоновой кислоты фталоцианина кобальта, включенного в пропиленгликолевый эфир b-циклодекстрина (ЭТФ-К), лиофилизированный, 0,040г для инъекций во флаконах объемом 10мл. Изготовлено 120 флаконов по 0,040 мг активного вещества препарата «ЭФИТЕР» опытных партий 001.126-К.102002, 002.127-К.042003 и 003.128-К.042003.

   Завершены исследования по стандартизации субстанции ЭТФ-К и начаты исследования по стандартизации препарата «ЭФИТЕР» по биологическим параметрам – специфической противоопухолевой активности, токсичности и пирогенности. Показано, что образцы ЭТФ-К партий 127-К, 128-К, 129-К, 130-К (укрупненные лабораторные партии), 3 (опытно-промышленная партия), а также опытных партий препарата «ЭФИТЕР» 001.126-К.102002, 002.127-К.042003, 003.128-К.042003 идентичными по специфической противоопухолевой активности и токсичности, а субстанция ЭТФ-К партий 3 (опытно-промышленная партия), 3.1, 3.2 и 3.3 (образцы опытно-промышленной партии 3 после переработки) в составе БКС характеризуется более выраженными токсическими свойствами и нестандартны по показателю «растворимость». Определена тест-доза для контроля качества субстанции ЭТФ-К и препарата «ЭФИТЕР» в составе БКС по токсичности.

   Доклиническое изучение препарата ЭФИТЕР

   а) Изучение общетоксического действия БКС ЭФИТЕР + АК на грызунах

   Проведены исследования по изучению “острой” и “хронической” токсичности БКС ЭФИТЕР + АК на мелких лабораторных животных (мышах и крысах) и “субхронической токсичности” на кроликах.

   В результате изучения “острой” токсичности установлены критерии количественной токсичности БКС ЭФИТЕР + АК для мышей при внутривенном применении: LD₁₀ – 333 (297-373) мг/кг; LD₁₆ – 347 мг/кг; LD₅₀ – 430 (384-482) мг/кг; LD₈₄ – 516 мг/кг.

   Установлено, что наиболее чувствительным видом из мелких грызунов к токсическому действию БКС при внутривенном применении в дозах, рассчитанных на массу тела являются крысы, а в дозах, рассчитанных на поверхность тела, мыши и крысы имеют одинаковую чувствительность к токсическому действию БКС. Причиной смерти грызунов от однократного применения БКС ЭФИТЕР + АК в летальных дозах является сердечно-сосудистая недостаточность.

   «Субхроническую» токсичность БКС ЭФИТЕР + АК исследовали на кроликах при 3-кратном внутривенном введении. В качестве исходной дозы при изучении «субхронической» токсичности на кроликах использовали LD₁₀ (МПД), установленную в опытах на мышах, считая, что МПД для мышей при пересчете на поверхность тела кроликов является эквивалентной по количественной токсичности для кроликов, т.е. соответствует мышиному эквиваленту (MeLD₁₀).

      В результате проведенных исследований установлено, что 3-кратное внутривенное введение кроликам БКС ЭФИТЕР + АК в суммарных дозах, равных MeLD₁₀ (суммарная доза – 78 мг/кг; разовая доза – 26 мг/кг) и 2 MeLD₁₀ (суммарная доза – 156 мг/кг; разовая – 52 мг/кг) не оказывает выраженного токсического действия на организм животных. В связи с отсутствием достаточного количества стандартной субстанции ЭТФ-К вид дозолимитирующей токсичности не установлен.

   Исследования по изучению «хронической» токсичности БКС на основе препарата «ЭФИТЕР» были проведены на 60 неинбредных крысах, самцах при 10-кратном внутрибрюшинном введении. В качестве исходной дозы при изучении «хронической» токсичности на крысах использовали LD₁₀ (МПД), установленную в опытах на мышах, считая, что МПД для мышей при пересчете на поверхность тела крыс является эквивалентной по количественной токсичности для крыс, т.е. соответствует мышиному эквиваленту (MeLD₁₀).
Критериями оценки «хронической» токсичности являлись: клиническая картина интоксикации, данные клинико-лабораторных исследований и поведенческие реакции.  Продолжительность наблюдения за животными – 60 суток. БКС ЭФИТЕР + АК в диапазоне исследуемых доз не оказывает токсического действия на периферическую кровь, печень и почки. Отсутствовала также гастроинтестинальная токсичность. На данном этапе исследований вид дозолимитирующей токсичности БКС ЭФИТЕР + АК не установлен.

   б) Изучение противоопухолевой эффективности бинарных каталитических систем ЭТФ-К+АК  и ЭФИТЕР + АК

   Проведены исследования по изучению противоопухолевой эффективности каталитической системы ЭФИТЕР + АК при использовании различных схем  введения для лечения солидных и асцитных опухолей. Установлено, что оптимальной схемой лечения мышей с АОЭ бинарной каталитической системой на основе препарата ЭФИТЕР является однократное внутрибрюшинное введение компонентов системы в режиме:

     ЭФИТЕР (250 мг/кг), 0 минут + АК (443 мг/кг); М:М – 1:30.

Оптимальной схемой лечения мышей с LLC бинарной каталитической системой на основе препарата «ЭФИТЕР» является 5-кратное (ежедневное) внутривенное введение компонентов системы в режиме:

      ЭФИТЕР (250 мг/кг), 60 минут + АК (443 мг/кг); М:М – 1:30.

Солидная форма лимфолейкоза Р-388 оказалась опухолью наиболее чувствительной к лечению БКС на основе препарата «ЭФИТЕР» т.к. при использовании всех схем лечения наблюдали торможения роста опухоли на 50% - 80%. Наилучшие результаты были получены при ежедневном 5-кратном применении БКС в разовой дозе, равной 250 мг/кг – ТРО на уровне 70% - 80% наблюдали в течение 10 дней .

   Механизм действия каталитических систем, разработка подходов, методов и приборов для его изучения 

   Исследование спектров поглощения Терафтала в модельных биологических средах и тканях in vivo при лазерном воздействии

   На предыдущем этапе работы был обнаружен сильный фототоксический эффект для препаратов Тф и АК при облучении светом нормальной ткани животных. Одной из задач данного этапа было определение эффективности светового воздействия на опухоли животных в комбинации с Тф  и АК. Мышам породы F1 с привитыми карциномами Эрлиха вводили внутривенно Тф из расчета 20 мг/кг, через некоторый интервал времени после введения Тф (от 2 до 24 часов)  вводили АК внутрибрюшинно из расчета 250 мг/кг и через  15 минут после введения АК проводили световое воздействие. Для облучения использовали лазер с длиной волны 680 нм и плотностью мощностью излучения 600мВт/см² (диаметр пятна 11мм). Продолжительность облучения – 15 минут, световая доза 560 Дж/см² .
Животные были разделены на 5 групп по 3 мыши в каждой группе:
      1. контроль без введения Тф и облучения,
      2. введение Тф и АК без облучения (обычный вариант терапии с Тф),
      3. введение Тф без АК, облучение через 2 часа после введения Тф,
      4. введение Тф и АК, облучение через 2 часа после введения Тф,
      5. введение Тф и АК, облучение через 24 часа после введения Тф.

   Проведение терапии с Тф по обычной методике привело лишь к стимулированию роста данной модели опухоли. Наибольший эффект дала комбинация Тф с АК и световым воздействием через 2 часа после введения Тф. Заметим, что при световом воздействии через два часа после введения Тф, но без введения АК тоже наблюдался эффект торможения роста опухоли. Мы предполагаем, что это связано с наличием собственной АК в мышах.  Альтернативное объяснение этого эффекта могло бы основываться на сенсибилизированной термотерапии, поскольку в данном случае используются довольно большие плотности мощности света (600 мВт/см²). Однако, при этом предположении введение АК вообще не должно влиять на эффект, что не подтверждается в данном эксперименте. По-видимому, в данном случае основную роль играет эффект усиления каталитической терапии под действием тепла. При этом генерация тепла происходит в окрестности молекулы Тф, что приводит к эффективному усилению его каталитических свойств окисления АК с  образованием радикалов.

   Согласно календарному плану изготовлен макет установки для контроля концентрации Тф в тканях in vivo при эндоскопическом обследовании. Для этой цели был разработан компактный волоконно-оптический спектрометр с USB - интерфейсом. Такое решение позволяет использовать данную установку, как с настольными, так и с Notebook компьютерами,  которые в последнее время широко используются в медицине как средства контроля и отображения информации.  Компактность данной системы позволяет легко разместить ее на стандартной эндоскопической стойке.  При этом, как показали результаты, полученные на первом этапе работы, в качестве широкополосного источника белого света можно использовать эндоскопический источник холодного света.

   Для контроля системы была создана программа, позволяющая в реальном масштабе времени проводить измерения и анализ полученных данных. Программа имеет дружественный интерфейс, и работает в различных операционных системах включая Windows-98, Windows Me, Windows 2000 и Windows XP. Система была апробирована при измерении концентрации Тф в различных тканях животных после внутривенного введения Тф. Были также проведены измерения концентрации Тф в коже и ротовой полости пациентов проходящих терапию с  этим препаратом.

   Исследования показали, что разработанная установка может быть использована для контроля за содержанием препарата Тф в тканях пациентов при оптимизации терапии с этим препаратом.  Особенно это важно при нескольких курсах терапии с тем, чтобы перед проведением очередного курса оценить оставшееся количество препарата в тканях.

   Химическое исследование механизма действия систем каталитической терапии

   В 2003 году исследованы основные направления расходования Н₂О₂ в системе АК + Тф, а также продолжено исследование состава и свойств надмолекулярных структур на основе разноименно заряженных фталоцианиновых комплексов. Показано, что в ходе окисления АК в присутствии Тф в реакционной смеси накапливается довольно большое количество перекиси водорода. Она является промежуточным продуктом и постепенно расходуется по двум реакциям: каталитического разложения в присутствии Тф и взаимодействия с продуктами окисления АК – прежде всего, с дегидроаскорбиновой кислотой (ДГАК). Установлено, что скорость расходования перекиси водорода в изучаемой системе является суммой скоростей каталитического разложения и взаимодействия с ДГАК. Продукты деструкции Тф не обладают каталитической активностью в реакциях с участием Н₂О₂.

   Исследование строения и свойств ассоциатов разноименно заряженных молекул РсМ состояло из определения стехиометрического состава ассоциатов и констант, характеризующих их прочность, изучения окислительно-восстановительных свойств и в характеристике каталитической активности ассоциатов. Установлено, что ассоциаты разноименно заряженных фталоцианинов состава АВ, АВ₂ и А₂В обладают высокой устойчивостью. Среди изученных систем наиболее прочными оказались ассоциаты на основе фталоцианина кобальта; для ассоциатов, содержащих один и тот же металл, структуры 2ОСРсМ:1Pym₈PcM прочнее, чем 2Pym₈PcM:OCPcM. В случае ассоциатов на основе двух разных металлов более устойчивыми являются те, одним из компонентов которых является РсСо. Методом электрофореза доказано существование следующих ассоциатов:OCPcCo-Pym₈PcCo = 1:1 и 2:1;OCPcCo-Pym₈PcFe = 2:1и1:1; OCPcCo-Pym₈PcCu = 2:1 и, вероятно, 1:2 или 1:1;ОСРсFe-Pym₈PcFe = 1:1. Эти данные подтверждают и дополняют сведения, полученные спектрофотометрическим (Job’s) и каталитическим – в реакции окисления аскорбиновой кислоты – методами. Отработаны условия электрохимического исследования ассоциатов на основе разноименно заряженных фталоцианинов. Показано, что ЭТФ образует с Pym₈PcCo ассоциат состава 2 : 1. Это фиксируется спектрофотометрически и в катализе (возрастание каталитической активности в 60 раз по сравнению с ЭТФ и в 6 раз по сравнению с Pym₈PcCo). В условиях экспериментов не обнаружено сколько-нибудь существенных изменений в значениях окислительно-восстановительных потенциалов и в форме циклических вольтамперограмм.

   Проведена оценка каталитической активности ассоциатов. Показано, что каталитическая активность ассоциатов состава 2:1 и 1:1 значительно отличается от активности  индивидуальных комплексов, входящих в состав ассоциата. Образование надмолекулярных структур может приводить как к увеличению каталитической активности в несколько раз, так и к полной дезактивации комплексов, входящих в состав этих структур. Оценена каталитическая активность шести новых водорастворимых фталоцианиновых комплексов в окислении аскорбиновой кислоты. Установлено, что все комплексы с отрицательными зарядами в заместителях по активности близки к Тф, а с положительными зарядами к Pym₈PcCo.

   С целью выяснения возможностей применения Pym₈PcCo в КТР исследована каталитическая активность этого фталоцианина в присутствии полимера DIVEMA (сополимера дивинилового эфира и малеинового ангидрида). Показано, что Pym₈PcCo образует с DIVEMой комплекс, неактивный в каталитическом окислении аскорбиновой кислоты, при этом один моль полимера связывает 30-35 молей фталоцианина. Таким образом, использование полимера как носителя для Pym₈PcCo позволяет резко уменьшить токсичность этого фталоцианина и, по-видимому, может создать условия для его применения в КТР.

     ВЫВОДЫ

   По отработанной технологии наработаны опытные партии субстанции Тф общей массой 500 г, соответствующие требованиям ФСП № 42-0047168001 и опытные партии препарата Тф-кислота общей массой 300 г, соответствующие требованиям СТП № 9318-19-057848-466-00. Наработано 360 флаконов препарата Тф – лио. На опытном заводе по модернизированной технологии получено 360 г. комплекса метилполиоксиэтиленового эфира Тф (ЭТФ) с оксипропилированным b-циклодекстрином - (ЭТФ-К), соответствующим по физико-химическим показателям требованиям нормативно – технической документации , но не соответствующим по пирогенности. Изготовлено 120 флаконов по 0,040 мг активного вещества препарата «ЭФИТЕР»

   В соответствии с протоколом 1/2000 лечение каталитической системой на основе Тф получили 22 больных (46 курсов) с разными формами и локализациями злокачественных новообразований. У всех больных исчерпаны существующие методы лечения, заболевание находится в стадии генерализации процесса. Существенных осложнений или побочных явлений не выявлено. У  3 больных – эффект не оценен, у 1 больной  – уменьшение размеров опухолевых очагов и стабилизация процесса,  у 9 больных – прогрессирование процесса после более или менее длительной стабилизации, у 9 больных – прогрессирование процесса без стабилизации.

   В соответствии с протоколом 2-2002 (II фаза клинических испытаний каталитической системы на основе Оксикобаламина) лечение получили 27 больных (59 курсов) с разными формами злокачественных новообразований.  В 1 случае наблюдался  минимальный лечебный эффект, в 2 случаях – эффект не оценен,  в 5 случаях отмечено прогрессирование процесса  после более или менее длительной (до 4.5 месяцев) стабилизации, в 19 случаях – прогрессирование процесса.

   Подготовлен протокол по изучению эффективности селективно-окклюзионного метода применения каталитической системы «ТФ+АК» для лечения первичных и метастатических опухолей печени. Получено  разрешение Комитета по этике при федеральном органе контроля качества, эффективности, безопасности лекарственных средств на включение кафедры хирургии печени ММА им И.М. Сеченова в число клинических баз по изучению эффективности внутривенного селективно - окклюзионного способа применения каталитической терапии Тф+АК больным с опухолями печени (Протокол 41 от 21.10.03 г.).

   Проведено электронно-микроскопическое и иммуногистохимическое изучение динамики патоморфоза в опухоли при сонодинамической терапии с использованием ТФ. Установлено, что УЗ вызывает в опухоли обширные повреждения кровеносных сосудов, массивные кровоизлияния, а также повреждает плазматические мембраны, митохондрии и другие органоиды в опухолевых клетках, что ведет к значительному ухудшению питания, оксигенации и развитию в соответствующих участках опухоли некрозов.

   УЗ оказывает ингибирующее действие на неоангиогенез в сохранившихся участках опухоли и, тем самым, препятствует росту новообразования. Каталитическая пара ТФ+АК усиливает антиангиогенный эффект УЗ.

   Начато систематическое исследование токсичности сочетанного применения каталитической терапии и ультразвука. Подтверждено, что совместное применение каталитической пары и ультразвука взаимно увеличивает терапевтические эффекты каждого фактора. Показано, что совместное действие ультразвука и каталитической пары увеличивает образование некрозов, кровоизлияний, повышает активность апоптоза, нарушает мембраны клеток, митохондрий и ядер.

   Проведен комплекс биохимических исследований, раскрывающий новые аспекты механизма действия Тф и каталитической системы. Впервые на культуре клеток рака яичника человека с использованием зонда Н₂DCFDA подтверждено образование в клетках свободных радикалов кислорода при действии Тф и Тф+АК. Компоненты каталитической системы Тф и АК в зависимости от их концентрации в инкубационной среде могут выступать как продуцентами свободных радикалов, так антиоксидантами.

   Разработана лекарственная форма препарата II поколения для бинарной каталитической терапии (БКТ) на основе метилполиэтиленгликолевого эфира окта-4,5-дикарбоновой кислоты фталоцианина кобальта (ЭТФ) – препарат ЭФИТЕР. Проведена стандартизация субстанции ЭТФ-К и препарата ЭФИТЕР по биологическим параметрам (токсичности, пирогенности и противоопухолевой активности). Полученные данные свидетельствуют о необходимости завершения доклинических исследований (токсикология на крупных животных – кроликах и собаках) и подаче пакета нормативно-технической документации на препарат «ЭФИТЕР» и БКС на его основе в МЗ РФ с целью получения разрешения на клинические испытания по I фазе этих фармакологических средств у больных злокачественными новообразованиями.

   Изготовлен макет установки для контроля концентрации Тф в тканях in vivo при эндоскопическом обследовании. Разработан компактный волоконно-оптический спектрометр с  USB- интерфейсом. Для контроля системы создана программа, позволяющая в реальном масштабе времени проводить измерения и анализ полученных данных. Проведены измерения концентрации Тф в коже и ротовой полости пациентов, проходящих терапию с этим препаратом.

   Исследованы основные направления расходования Н₂О₂ в системе Тф + АК.  Показано, что скорость расходования Н₂О₂ в изучаемой системе является суммой скоростей каталитического разложения и взаимодействия с ДГАК. Спектрофотометрическим методом изучены строение и свойства ассоциатов разноименно заряженных молекул РсМ. Рассчитаны константы нестойкости ассоциатов различного состава, изучены окислительно-восстановительные их свойства в водных и неводных средах, охарактеризована их каталитическая активность. Исследована каталитическая активность Pym₈PcCo в присутствии полимера DIVEMA. Показано, что Pym₈PcCo образует с DIVEMой комплекс, неактивный в каталитическом окислении аскорбиновой кислоты; один моль полимера связывает 30-35 молей фталоцианина. Использование полимера как носителя для Pym₈PcCo позволяет резко уменьшить токсичность этого фталоцианина и может создать условия для его применения в КТР.

   Область применения – медицина.

   Преимущества перед аналогами

   Подходы, препараты и системы, разрабатываемые в рамках данного договора, являются полностью оригинальными и не имеют аналогов ни в отечественной, ни в зарубежной практике и литературе. Потребность в компонентах БКС будет определена после окончательного решения по спектру опухолей, чувствительных к БКС и количеству курсов в цикле лечения.

   Степень готовности

   Каталитические системы на основе препаратов Терафтал и Оксикобаламин проходят II фазу клинических испытаний в РОНЦ РАМН, МНИОИ им. П.А.Герцена, НИИ онкологии им. Н.Н.Петрова (С.-Петербург). Проведена стандартизация субстанции ЭТФ-К и препарата ЭФИТЕР по физико-химическим и биологическим параметрам (токсичности, пирогенности и противоопухолевой активности). Разработан пакет нормативно-технической документации (ФСП) на субстанцию и препарат «ЭФИТЕР», который будет подан по завершении токсикологических исследований в МЗ РФ с целью получения разрешения на клинические испытания по I фазе у больных злокачественными новообразованиями. Оформлены протоколы клинических испытаний на сочетанное применение каталитической системы на основе Терафтала и слабой гипертермии, а также на варьирование режимов введения компонентов каталитической системы на основе Оксикобаламина. Подана заявка на получение патента по сочетанному применению каталитических систем и радиологии для лечения злокачественных новообразований.

   Правовая защита

   Номера и даты оформления (выдачи) правоохранительных документов по данной конкретной продукции, а также аналогичные данные по ранее полученной продукции, которая была использована в данной работе:

   Терафтал +АК. Патент РФ № 2106146 от 10.03.98 г., Европейский патент №0786253, патент США № 6004953;

   Терафтал+АК+УЗ. Патент РФ № 2188054 от 27.08.02 г.;

   Цитостатики+Терафтал+АК. Патент РФ № 2114623 от 10.07.98 г.;

   Селективно-окклюзионный метод введения системы Терафтал+АК. Патент РФ №2200479 от 20.03.03 г.;

   Эфитер+АК. Патент РФ № 2172319 от 20.08.01 г. 

   Ожидаемый технико- экономический эффект от внедрения проекта в сравнении с существующими аналогами

   Основной эффект от реализации данного проекта заключается в решении социальной задачи повышения качества и результативности лечения онкологи-ческих заболеваний.

   Предложения по реализации научно - технической продукции

   Полученные в рамках работы результаты будут использованы для принятия решений по широкому клиническому применению бинарных каталитических систем (БКС) для лечения злокачественных новообразований, а также для создания новых БКС и новых вариантов их индивидуального и сочетанного применения.